随着用于医学和研究目的的大-麻合法化程度的提高，对其活性成分进行准确，高通量分析的需求急剧增加。

最重要的两个是具有治疗用途的精神活性THC和止痛CBD。 THC和CBD的比例对于区分药用大-麻和休闲大-麻至关重要。这个比例对税务部门，医疗监管者和种植者都非常重要。

THC / CBD比率的确定

准确测定THC / CBD的比例至关重要，这是通过对大-麻叶，芽和花的样品进行有效的样品制备来确定的。传统的样品制备方法已使用拍打或研磨机将这些材料均质化。当在聚丙烯微孔板中进行操作时，这些机器施加的极-端压力通常会损坏孔板，从而导致破裂，渗漏并最终导致交叉污染。分析的目的是确定总THC。

这包括无羧酸盐形式（THCA）以及热转化形式THC。医学价值是CBD含量的函数，CBD含量必须再次总计才能包括天然羧酸形式。

高效液相色谱（HPLC）可以在将THCA和CBD的酸成分转化为相应的游离形式的THC和CBD之前鉴定它们的酸成分，因此首-选mouth剂和大-麻产品。

气相色谱（GC）分析的一个缺点是热注射器中THCA和TBDA的破坏，这可能会使THC / TBD比的最终数据不准确。因此，HPLC / UV或LC / MS应该是首-选的分析方法。以下方法也可用于制剂和植物原料。

仪器与方法

• Porvair Sciences 2ml深孔种子基因组微孔板219030

• Porvair Sciences 96孔盖垫219004

• Porvair Sciences Microlute真空歧管228008

• Porvair Sciences Microlute P3板240100

• 具有96孔螺旋针头的Porvair Sciences Minivap蒸发器（229206＆229072）

• 具有3板适配器的Porvair Sciences Microshake微板振荡器（229651和229654）

• Porvair Sciences 2.2毫升方形深孔板（219009）

• 实验室研磨机（例如Spex GenoGrinder）

对于THC / CBD比率分析，应随机取样大-麻叶，芽和花的样品（如果有）。我们建议在Porvair 229030植物基因组板的每个孔中准确称量约50mg的干燥植物材料。

 将3 x 3mm的钢或镍研磨球（如果研磨种子材料，则需要镍）添加到植物基因组板中。

用219004盖垫密封板，然后将盖好的板放入GenoGrinder中。

在1500 rpm下研磨2分钟。取下盖垫，将干燥的地面粉末（应通过1毫米筛子）转移到Porvair P3过滤微孔板（240100）的每个孔中。

准确添加400ul甲醇或异丙醇（根据需要）以溶解植物材料中的油性残留物。

在Porvair Microshake摇床（229651）上用P3板适配器（229654）或其他合适的摇床以330 rpm的速度搅拌10分钟。

P3板中的超疏水玻璃料将防止泄漏，但为使您更加省心，可以使用可选的排水盖垫，如果需要，应在测定开始之前将其置于板的底面（219005）。

摇晃后，取下排液盖，将P3板放置在Porvair Microlute歧管（228008）上，该歧管在气室中具有2ml的收集板。该收集板可以是另一个种子基因组板（219030）或标准的2ml方孔板（219009）。任何SLAS / ANSI格式的深孔板均可用于收集步骤，但是219009和219030使用的是无萃取聚丙烯，不会对要分析的溶液产生渗滤液。

此外，其板的几何形状已针对Porvair Microlute歧管进行了优化，因此无需进一步调整即可防止孔之间的交叉污染。抽真空以将纯化的提取液向下抽吸通过过滤器并进入收集板的孔中。使用歧管上的阀隔离真空源，并使用针形阀释放增压室中的真空。现在可以丢弃滤板，可以将含有有机提取物的收集板带入HPLC进行分析。

如果首-选分析总THC和CBD，则需要执行额外的步骤。在这种情况下，必须通过加热将THCA和CBDA转化为THC和CBD。

取2ml含有溶剂提取物的收集板，将其放在Porvair Minivap上。将温度设置为最-高（60℃）并蒸发至干，继续用热气加热45分钟，以使热不稳定的THCA和CBDA解离为THC和CBD。冷却至室温后，将其重新悬浮在400ul的溶剂中，在微摇瓶上摇晃硅藻土以确保充分混合，然后进行HPLC分析。